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胚胎玻璃化冷冻过程

  • admin
  • 2018-12-27 11:09:54
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玻璃化指的是一种介于液态与固态之间的状态,在此型态中,避免晶体结构的形成。一直以来,在冷冻任何细胞的过程中,最怕的就是细胞内的水分形成体积较大的冰晶,因而破坏细胞内的胞器、纺锤体或细胞骨架,进而影响细胞正常功能,严重时会使细胞无法存活。玻璃化冷冻(Vitrification),是利用高浓度的冷冻保护剂,在短时间内置换掉细胞内的水分,接着以非常快的速度(约2000℃/每分钟)进行降温,使细胞内的液体变成类似高粘稠、高浓度的玻璃化物质,来减少冰晶所造成的伤害。


原理:利用浓度更高的冷冻保护剂(DMSO、EG、SUCROS)将细胞内水份脱水至细胞外,细胞内的物质瞬间变成高黏稠固态的非结晶玻璃状物质,使细胞内冰晶来不及形成就被冰冻起来,降低冰晶对胚胎的伤害,再直接将胚胎置入摄氏零下196度的液态氮中保存。


解冻则直接将含有胚胎的冷冻细管载体(cryoloop,cryotop,cryoleaf等)直接放入预温37℃的解冻液内,将冷冻保护剂替换至细胞外,再放回培养液内继续培养,此方法解冻后胚胎存活率可达90-95%。


目前大多数生殖医学中心以玻璃化方法来冷冻胚胎,它不需有电脑控制冷冻仪且缩短操作时间。由于冷冻保护剂浓度更高,最后冰冻时体积越少越好,如此可获得胚胎解冻后的高存活率。


胚胎玻璃化冷冻

胚胎玻璃化冷冻图